支原體藥敏試驗通常通過采集分泌物或組織樣本進行實驗室培養(yǎng)和藥物敏感性檢測。主要有咽拭子培養(yǎng)、尿液抗原檢測、血清抗體檢測、PCR核酸擴增、微量肉湯稀釋法等方法。
使用無菌棉簽在患者咽后壁反復(fù)擦拭獲取分泌物樣本,將樣本接種于專用支原體培養(yǎng)基中。該方法操作簡便但培養(yǎng)周期較長,需3-7天才能觀察到支原體菌落生長。培養(yǎng)陽性后可進一步進行藥敏試驗,常用培養(yǎng)基包括PPLO肉湯和SP4瓊脂。
采集晨起首次排尿的中段尿10-15毫升,通過酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測尿液中支原體特異性抗原。該方法適用于泌尿生殖道支原體感染檢測,具有非侵入性優(yōu)勢,但靈敏度受尿液稀釋度影響。陽性樣本可配合微量稀釋法進行后續(xù)藥敏分析。
抽取靜脈血2-3毫升分離血清,采用補體結(jié)合試驗或顆粒凝集試驗檢測支原體特異性IgM和IgG抗體。該方法主要用于肺炎支原體感染的輔助診斷,抗體效價變化可反映感染進程,但無法直接指導(dǎo)用藥,需結(jié)合其他檢測方法綜合判斷。
通過實時熒光定量PCR技術(shù)擴增支原體16S rRNA或特定耐藥基因片段。該方法靈敏度高,3-5小時即可出結(jié)果,能同時檢測多種支原體亞型及其耐藥基因突變。陽性結(jié)果可提示臨床潛在耐藥風(fēng)險,但需培養(yǎng)法補充驗證實際藥物敏感性。
將純化培養(yǎng)的支原體菌株接種于含梯度濃度抗生素的液體培養(yǎng)基,觀察48-72小時生長抑制情況。該方法為國際標準藥敏試驗,可測定支原體對四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類等8-12種抗生素的最低抑菌濃度,結(jié)果以敏感、中介或耐藥三級報告。
進行支原體藥敏試驗前應(yīng)避免使用抗菌藥物3天以上,采樣時注意無菌操作防止污染。不同檢測方法各有側(cè)重,臨床常需聯(lián)合應(yīng)用以提高準確性。獲取藥敏報告后應(yīng)在醫(yī)生指導(dǎo)下選擇敏感抗生素,完成規(guī)定療程,期間避免擅自調(diào)整用藥。治療期間建議多飲水保持排尿通暢,注意休息和營養(yǎng)補充,避免辛辣刺激食物。
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